紫外分光光度計是實驗室中常用的分析儀器,比例雙光束紫外分光光度計因其能自動消除光源強度變化帶來的誤差而備受青睞。為了確保其測量準確性,定期進行校準是重要的步驟。
一、準備工作
確保比例雙光束紫外分光光度計放置在平穩的工作臺上,避免因震動或傾斜影響測量精度。
檢查電源線是否完好,確保電源電壓與儀器額定電壓相符。
根據需要選擇合適的光譜帶寬和波長范圍。
二、光源校準
打開儀器電源,預熱約20分鐘,使光源穩定。
選擇波長校準模式,通常儀器會有專門的校準波長。
將標準光源接入儀器,調整光路,使光束通過校準器并進入檢測器。
觀察儀器顯示的吸光度值,并與標準光源的理論值進行比較,如有偏差則進行調整,直至達到校準要求。
三、波長校準
仍在光源穩定的狀態下,選擇波長掃描模式。
設置掃描的起始波長和終止波長,并啟動掃描。
觀察掃描圖譜,檢查是否有明顯的峰值或拐點,這些可能是波長不準確的標志。
根據需要調整波長校準旋鈕,直至圖譜上的峰值或拐點與理論值相符。
四、吸光度校準
準備已知濃度的標準溶液。
將標準溶液置于比色皿中,并放入樣品室。
選擇適當的波長,并測量標準溶液的吸光度值。
根據標準溶液的濃度和測得的吸光度值,計算出儀器的吸光度校準系數。