雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要用于測(cè)量樣品溶液的吸光度或透射率。它的工作原理基于比爾-朗伯定律，即溶液的吸光度與溶液中溶質(zhì)的濃度成正比，其特點(diǎn)是具有兩個(gè)獨(dú)立的光路，一個(gè)用于參考光束，另一個(gè)用于樣品光束。這種設(shè)計(jì)可以有效地消除光源強(qiáng)度波動(dòng)、探測(cè)器響應(yīng)變化等因素的影響，提高測(cè)量的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
主要組成部分包括光源、單色器、樣品室、探測(cè)器和顯示器。光源通常采用氘燈(紫外區(qū))和鎢燈(可見(jiàn)區(qū))，可以提供連續(xù)的光譜。單色器用于從光源發(fā)出的寬帶光譜中選擇特定波長(zhǎng)的光，通常采用光柵或棱鏡作為分散元件。樣品室用于放置待測(cè)樣品，通常采用石英或玻璃制成，以保證在紫外和可見(jiàn)區(qū)域的透光性。探測(cè)器用于檢測(cè)通過(guò)樣品后的光強(qiáng)，常用的有光電二極管、光電倍增管等。顯示器用于顯示測(cè)量結(jié)果，可以是數(shù)字顯示屏或計(jì)算機(jī)屏幕。
雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理如下：
1.光源發(fā)出的寬帶光譜經(jīng)過(guò)單色器后，選擇出特定波長(zhǎng)的光。這個(gè)特定波長(zhǎng)的光被分為兩束，一束作為參考光束，另一束作為樣品光束。
2.參考光束直接照射到探測(cè)器上，探測(cè)器將光強(qiáng)信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，并傳輸給顯示器。顯示器記錄下參考光束的光強(qiáng)值，作為后續(xù)計(jì)算的基準(zhǔn)。
3.樣品光束照射到樣品室中的樣品溶液上，部分光被樣品吸收，部分光透過(guò)樣品。透過(guò)樣品的光照射到探測(cè)器上，探測(cè)器將光強(qiáng)信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，并傳輸給顯示器。顯示器記錄下樣品光束的光強(qiáng)值。
4.顯示器根據(jù)比爾-朗伯定律，計(jì)算出樣品溶液的吸光度或透射率。具體計(jì)算公式為：吸光度A=log(I0/I)，其中I0為參考光束的光強(qiáng)值，I為樣品光束的光強(qiáng)值。透射率T=(I/I0)×100%，表示樣品對(duì)光的透過(guò)程度。
5.通過(guò)改變單色器的設(shè)置，可以選擇不同的波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)量，從而得到樣品溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光度或透射率曲線(xiàn)。這些曲線(xiàn)可以用于分析樣品的成分、濃度等信息。
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